Buenas Prácticas

10 Errores Comunes al Pipetear y Cómo Evitarlos

Puedes tener la micropipeta mejor calibrada del mundo y aun así obtener resultados erróneos si la técnica de pipeteo es deficiente. Repasamos los 10 errores más comunes que vemos en laboratorios y cómo eliminarlos de tu rutina.

Estudios de proficiencia en laboratorios muestran que una parte importante de los resultados fuera de especificación no proviene del instrumento, sino de la técnica del operador. Estos son los 10 errores más frecuentes y cómo corregirlos:

1. Pipetear con ángulo excesivo

Sostener la pipeta a más de 20° de la vertical durante la aspiración provoca que ingrese más líquido del debido por presión hidrostática. Solución: aspirar siempre con la pipeta lo más vertical posible (máximo 20°).

2. No prehumedecer la punta

La primera dispensación con punta seca entrega menos volumen porque parte del líquido queda como película interna y se pierde por evaporación en el espacio de aire. Solución: aspirar y dispensar 2 o 3 veces antes de la medición real.

3. Profundidad de inmersión incorrecta

Sumergir demasiado la punta adhiere líquido al exterior; sumergirla muy poco puede aspirar aire. Solución: 2-3 mm para volúmenes pequeños, 3-6 mm para volúmenes grandes.

4. Velocidad de aspiración brusca

Soltar el émbolo de golpe genera aerosoles, burbujas y salpicaduras internas que descalibran la medición. Solución: liberar el émbolo de forma lenta y controlada, esperando 1 segundo con la punta sumergida.

5. No respetar el tiempo de espera

Los volúmenes grandes requieren un tiempo de estabilización antes de retirar la punta del líquido. Solución: esperar al menos 1 segundo (3 segundos en volúmenes >1 mL) tras aspirar.

6. Usar puntas no compatibles

Puntas genéricas de mala calidad no sellan correctamente con el cono y generan fugas de aire. Solución: usar puntas recomendadas por el fabricante o verificadas por tu laboratorio.

7. Cambios de temperatura entre pipeta y líquido

Pipetear líquidos fríos o calientes con una pipeta a temperatura ambiente altera el volumen entregado por expansión o contracción del aire interno. Solución: equilibrar térmicamente muestras y pipeta; en su defecto usar pipeteo inverso.

8. Dejar la pipeta acostada con líquido en la punta

El líquido puede escurrir hacia el interior del cono y corroer el pistón o contaminar el instrumento. Solución: mantener la pipeta siempre vertical en su soporte.

9. Ajustar el volumen de forma incorrecta

Llegar al volumen deseado girando hacia abajo desde un volumen mayor o hacia arriba desde uno menor de forma inconsistente introduce histéresis mecánica. Solución: ajustar siempre en el mismo sentido, terminando con un giro descendente lento.

10. No calibrar periódicamente

El desgaste de sellos y resortes causa deriva gradual imposible de detectar a simple vista. Solución: calibración con laboratorio acreditado al menos una vez al año, y verificaciones intermedias internas.